我用MitoTracker Red CMXRos標記神經元后，它們第二天就死了，這是否正常？

Mitotracker染料應在染色之后立即成像，因為隨著時間的推移，這些染料可能會產生毒性。

流式細胞儀能分析哪些細胞過程？

•鈣流：每一種Oregon Green鈣指示劑都可通過更高的親和力結合胞內鈣離子，提供適合很多應用的靈敏度范圍。Oregon Green探針在Ca2+靜息水平下發(fā)射綠色熒光;Ca2+濃度增加時，熒光強度會增加14倍。細胞通透配方（貨號O6807）能加入到細胞培養(yǎng)基中并與流式細胞儀兼容。

•基于羅丹明的鈣離子指示劑包含了大量不同的探針，用于探測Ca2+濃度的大小變化。該指示劑與鈣離子結合后，會發(fā)出50倍增強的熒光。這一類波長范圍的熒光可與GFP或綠色熒光染料結合，用于多重檢測應用。Rhod-2， AM（貨號R1245MP）專門靶向線粒體，可與流式細胞儀聯(lián)用。

•?膜電位：細胞凋亡初期的典型特征是線粒體紊亂，伴隨著膜和氧化還原電位變化。我們提供一系列專門用于流式細胞術活細胞線粒體膜電位分析的產品，可最大限度避免影響細胞功能。對于細胞凋亡過程出現(xiàn)的線粒體膜電位損失，MitoProbe系列線粒體染色劑（貨號M34150、M34151和M34152）可提供快速、簡單和可靠的流式細胞術檢測方法。MitoTracker染料（貨號M7510和M7512）是用于染色活細胞內的線粒體的膜電位依賴型探針。在之后的流式細胞免疫化學、DNA末端標記，原位雜交或復染色步驟中，MitoTracker染料的染色圖案全程保留。相比于只依賴線粒體膜電位的檢測方法，線粒體通透性轉移孔檢測體系（貨號M34153）可直接測定通透性轉移孔開合情況。線粒體通透性轉移孔（MPTP）是一個由線粒體內膜和外膜成分構成的非特異性通道。在細胞死亡過程中，此通道顯現(xiàn)，參與線粒體成分釋放。

•吞噬作用：在吞噬過程中，細胞內吞微粒（如微生物）。此過程對于免疫應答非常重要，同時對清除凋亡細胞也非常重要。研究吞噬作用的探針包括BioParticles指示劑——用熒光標記的細菌和酵母。

•使用淬滅/洗滌檢測法來追蹤吞噬過程能夠表征簡單的攝入，或利用一種pH指示劑監(jiān)視吞噬途徑的各個階段。我們提供pHrodo Red或Green（貨號A10010、P35361、P35364、P35365、P35366和P35367）標記的免洗檢測體系和全血的免洗檢測體系（貨號A10025、A10026、P35381和P35382），都適用于流式細胞儀。

•?pH改變：可使用熒光強度或比率計測定法測定生理學范圍內的細微pH變化。pHrodo 染料（貨號P35373和P35372）提供了pH2-9之間的信號強度調制，同時可以選擇各種熒光波長。熒光右旋糖酐內吞示蹤是分析細胞區(qū)室pH變化的常用方法。pHrodo染料的右旋糖酐偶聯(lián)物（貨號P35368和P10361）可用于區(qū)分從早期的核內體到溶酶體在內的各種囊泡，不需要洗滌和淬滅，是最完整的解決方案。

•活性氧：處于環(huán)境壓力下的細胞通常含有超高水平的活性氧（ROS）。CellROX試劑是為檢測和定量活細胞中的ROS而開發(fā)的熒光探針。這些細胞通透性試劑在還原態(tài)時不發(fā)熒光或發(fā)微弱的熒光；在被氧化后，就發(fā)出明亮的熒光且依舊位于細胞內。我們提供已通過流式細胞術驗證的CellROX Green（貨號C10492）CellROX Orange（貨號C10493）和CellROX Deep Red（貨號C10491）檢測試劑盒。